摇菌管在科研中作用重大,但使用时有哪些注意事项呢?
摇菌管是实验室中常用的耗材,使用时需特别注意。首先,为确保无菌操作,摇菌管在使用前需进行严格消毒处理。其次,加入的菌液量不宜过多,一般建议不超过管体积的十分之一,这样可以保证细菌有足够的生长空间和氧气供应。在摇菌过程中,要合理控制摇床的转速和时间,避免过度摇晃对细菌造成损伤。此外,摇菌管盖子需盖紧但也要保证一定的透气性,可以使用无菌透气封口膜。值得注意的是,摇菌管的管体底部为弧形,有利于细菌培养液在管体内的流动,管体的下端带有搅拌部件,可以缓慢搅拌细菌培养液,使其和氧气平衡分布。总之,正确使用摇菌管对于实验的准确性和成功率至关重要。
摇菌管(又称离心管、培养管或振荡培养管)是微生物培养和分子生物学实验中常用的耗材,主要用于液体培养基中细菌、酵母等微生物的振荡培养。以下是天正信达对其使用注意事项,涵盖选择、操作、灭菌及常见问题解决:
一、摇菌管的正确选择
材质:
聚丙烯(PP):耐高温(121℃灭菌)、耐化学腐蚀,适用于大多数微生物培养。
聚碳酸酯(PC):透明性好,但耐高温性较差(一般≤80℃),适用于低温实验。
玻璃:可重复灭菌,但易碎,需注意密封性(需配合硅胶塞)。
容量:
常规规格:5mL、15mL、50mL,根据培养体积选择(一般装液量为管容量的20%-30%,如50mL管装10-15mL培养基,避免溢出)。
盖子类型:
透气盖:带疏水滤膜,允许气体交换(如CO?/O?),适用于需氧培养(如大肠杆菌)。
密封盖:密闭,适用于厌氧菌或防止污染的实验。
二、使用注意事项
1. 灭菌处理
高压灭菌:PP材质可121℃高压灭菌15-20分钟,灭菌前确保盖子稍松开(冷却后拧紧)。
紫外线/酒精消毒:紧急情况下可用75%酒精浸泡或紫外线照射30分钟(效果不如高压灭菌)。
2. 装液与密封
装液量:不超过管容量的1/3(振荡培养时液体与空气充分接触,避免泡沫溢出)。
密封性:
需氧培养:透气盖需检查滤膜是否完整(避免污染)。
厌氧培养:确保盖子拧紧,必要时使用封口膜加固。
3. 振荡培养参数
转速:通常200-250 rpm(过高易导致泡沫或管壁破裂)。
温度:根据菌种需求设置(如大肠杆菌37℃,酵母30℃)。
平衡配重:摇床上的摇菌管需对称放置,避免重心不稳导致机器损坏。
4. 无菌操作
接种前用酒精灯火焰灼烧管口。
操作时避免手部接触管口和盖子内侧。
三、常见问题与解决
培养液泄漏:
原因:盖子未拧紧或密封圈老化。
解决:更换新盖或添加密封圈;振荡前检查盖子。
污染(培养基浑浊/异味):
原因:灭菌不或操作污染。
解决:重新灭菌;严格无菌操作;使用抗生素(如终浓度50μg/mL氨苄青霉素)。
管体破裂:
原因:转速过高、装液过多或材质不耐低温(如PC管在液氮中易裂)。
解决:降低转速;更换耐低温/耐高压的PP管。
泡沫过多:
原因:装液量过多或蛋白含量高(如LB培养基)。
解决:减少装液量;添加消泡剂(如0.01%-0.1% Silicone Antifoam)。
四、维护与储存
清洗:
使用后立即用清水冲洗残留培养基,避免蛋白质干结。
顽固污渍可用1% NaOH或中性洗涤剂浸泡后刷洗。
干燥与储存:
倒置晾干(避免水分残留滋生霉菌)。
存放于洁净、干燥处,避免紫外线直射(防止塑料老化)。
五、特殊应用提示
高通量筛选:使用深孔板(2mL/孔)替代摇菌管,提高效率。
敏感菌种:对剪切力敏感的菌(如放线菌),降低转速至150 rpm。
注意:不同品牌摇菌管的耐温/耐压性能可能差异较大,使用前务必查阅产品说明书!
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